Определение группы крови по системе Резус
Для безопасного проведения плановых переливаний цельной донорской крови или ее компонентов необходимо знание резус-фактора крови донора и реципиента. Определение резус-фактора проводится также всем донорам крови при их первой донации. Обязательно определение резус-фактора цоликлонами https://sangvitest.ru/opredelenie-rezus-faktora-coliklonami/ для беременных женщин с целью раннего выявления резус-конфликта (гуморального иммунного ответа матери имеющей Rh- кровь на антигены Rh+ плода) и профилактики ГБН (гемолитической болезни новорожденного).
Для определения резус-фактора крови необходимо:
а) выполнить проверку на присутствие на исследуемых эритроцитах сильной формы антигена D. Небольшое количество крови (1-2 капли) смешивается с эритроцитарным моноклональным диагностикумом Цоликлон Анти-D Супер (раствор полных антител класса IgM черного цвета). Исследование может выполняться и в пробирке, и на планшете для иммунологических исследований. Кровь типируется как резус положительная (Rh+), если наблюдается четкая, быстрая агглютинация эритроцитов (слипание и выпадение в осадок в виде хлопьев или глобул);
б) отсутствие явной и быстрой агглютинации указывает на возможное присутствие слабых форм антигена D. Для их выявления проводится исследование с использованием неполных антиэритроцитарных антител класса IgG и усилителя агглютинации — полиглюкина или желатина. Исследуемые эритроциты отделяются от сыворотки и инкубируются с цоликлоном ЭРИТРОТЕСТ Анти-D и высокомолекулярным соединением при температуре 47 градусов Цельсия. Образование хорошо различимых глобул или хлопьев должно произойти в течение примерно 10 минут. Реакция коглютинации считается состоявшейся и крови присваивается положительный резус-фактор (Rh+). Если же коглютинации не наблюдается, то кровь считается резус-отрицательной (Rh-). Параллельно выполняется отрицательный контроль — инкубация исследуемых эритроцитов с полиглюкином или желатином, но в отсутствии цоликлона ЭРИТРОТЕСТ Анти-D, агглютинация происходить не должна;
в) в спорных случаях — при нечеткой или плохо выраженной агглютинации (мелкие зерна или капли) — установление резус-принадлежности производится при помощи непрямой пробы Кумбса (непрямого антиглобулинового теста). Отмытые исследуемые эритроциты инкубируются при температуре 37 градусов Цельсия с диагностикумом ЭРИТРОТЕСТ-ЦОЛИКЛОН Анти-D 30 минут, затем центрифугируются, промываются (физиологическим раствором, 3% хлорид натрия) и смешиваются с антиглобулиновой сывороткой. При наблюдении реакции агглютинации крови присваивается положительный резус фактор, при отсутствии агглютинации кровь считается резус-отрицательной. Для резус-отрицательных образцов донорской крови следует провести доопределение эритроцитарных антигенов dCe или dcE при помощи выпускаемых компанией «Гематолог» растворов цоликлонов Анти-C, Анти-E и Анти-CE.